科学家们使用凯氏定氮法来分析一种物质中有机氮的百分比。氮的含量可以用来确定蛋白质的含量。该方法的全称是凯氏氮分析法,有时用蛋白质分析代替氮分析,但这些术语指的是相同的方法。 凯氏定氮法包括三个步骤,包括滴定1...
科学家们使用凯氏定氮法来分析一种物质中有机氮的百分比。氮的含量可以用来确定蛋白质的含量。该方法的全称是凯氏氮分析法,有时用蛋白质分析代替氮分析,但这些术语指的是相同的方法。

凯氏定氮法包括三个步骤,包括滴定1883年,化学家Johan Kjeldahl首次向丹麦化学学会提出了他的方法。他认为,由于氮是蛋白质中的主要元素,氮分析可以用来测定一种物质中蛋白质的含量。从那时起,他的发现得到了改进,但基本方法仍然有效凯氏定氮法包括三个步骤,通常称为消化、蒸馏和滴定。消化将氮分解成氨,蒸馏将氨与其他成分分离用滴定法计算氨的量,然后根据氨的量计算出氮和蛋白质的量,在消化步骤中,将待分析物质的一小部分样品与硫酸混合,硫酸钾和加速反应的催化剂。将混合物加热到很高的温度(高达750°F(约400°C))大约一小时,然后冷却在加热混合物中发生的反应将大分子分解成更小的组分,包括铵离子。蒸馏步骤通过向混合物中添加氢氧化钠将铵离子转化为氨气。然后提高溶液温度,将氨转化为挥发性气体,并在蒸汽中上升蒸汽被困在溶液中,如盐酸或硼酸。被困在酸中的氨会中和一些酸,这意味着它会降低pH值。中和后剩下的酸量用碱滴定,例如作为氢氧化钠,在酸和氨溶液中加入一种染料,当pH值改变时颜色会改变。然后在酸中加入少量的碱,直到溶液变色为止。达到这个终点所需的碱量可以用来计算原始溶液中氨的量为了计算氮的含量,科学家必须首先知道最终溶液中酸和碱的摩尔数。从酸的摩尔数中减去碱的摩尔数就得到氨的摩尔数。最终溶液中氨的摩尔数与氮的摩尔数相同,所以这个数字乘以14——氮的原子质量——就得到了氮的克数,氮的百分含量就是用氮的克数除以原始样品中的总克数,再乘以100蛋白质百分比凯氏定氮法是通过将氮的百分比乘以一个转换因子得到的。这个转换因子通常是6.25,除了一些物质,如小麦和乳制品。