什么是RNA凝胶电泳(RNA Gel Electrophoresis)?

在生物化学中,RNA凝胶电泳是一种常用的分析生物分子核糖核酸(RNA)的方法。凝胶电泳通过凝胶状化学物质制成的薄片"筛分"分子的大小和电荷来分离分子。这一过程通常用于实验室分析碎片脱氧核糖核酸(DNA)或RNA中含有有机体遗...
在生物化学中,RNA凝胶电泳是一种常用的分析生物分子核糖核酸(RNA)的方法。凝胶电泳通过凝胶状化学物质制成的薄片"筛分"分子的大小和电荷来分离分子。这一过程通常用于实验室分析碎片脱氧核糖核酸(DNA)或RNA中含有有机体遗传信息的分子。RNA凝胶电泳与DNA凝胶电泳在程序上略有不同,因为RNA分子不像DNA,是单链链,容易折叠成结构。这使得RNA片段按大小分离更为困难RNA凝胶电泳在程序上与DNA凝胶电泳略有不同,因为RNA分子是单链链,容易折叠成结构RNA凝胶电泳的第一步是从样本生物细胞中分离出RNA分子,将样本组织溶解在一种特定的化学混合物中进行纯化,以去除酶RNase,蛋白质,尤其重要的是,在这个过程中,样品在任何时候都不被核糖核酸酶污染,因为核糖核酸酶催化核糖核酸分子的降解,导致它们分裂。在样品被纯化后,将其冷冻,并加入另一种化学物质使核糖核酸沉淀,或以固体形式从溶液中滴出然后将样品放入离心机,离心机以高速旋转,并分离出样品管底部的固体沉淀物实验室使用凝胶电泳分析RNA片段。在DNA或RNA凝胶电泳程序中,纯化后的生物分子被添加到平的凝胶板一端的孔中,然后电流流过凝胶。由于DNA和RNA分子带负电,它们被吸引到凝胶远端的正极上,凝胶中的孔隙大小固定,因此较小的DNA或RNA片段比较大的片段迁移得更快,后者在多孔基质中的导航更困难凝胶运行一段时间后,切断电流并检查结果。此时可以对DNA或RNA分子进行染色并使其可见。每个片段将在凝胶中的不同点显示为一条带,这取决于它在凝胶中的迁移距离在比较样本时,如在法医学中,确定是否存在匹配的片段是有用的,相同的样本会有相同的带型凝胶可以运行,在正常情况下,RNA分子会聚集或折叠成二级结构,影响RNA片段在凝胶中的流动性为了防止这种情况的发生,RNA样品必须通过在样品和凝胶中添加一种化学物质(如甲醛)使其变性。
  • 发表于 2020-08-24 07:15
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  • 分类:科学教育

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