什么是二维凝胶电泳(2D Gel Electrophoresis)?

二维(2D)凝胶电泳是科学家们通过首先沿两个不同的轴分离蛋白质条带来分离和分析蛋白质混合物的方法,它是处理复杂或粘稠的蛋白质混合物时最常用的技术,通常蛋白质的大小是重叠的。二维凝胶电泳不同于一维凝胶电泳,因为前者...
二维(2D)凝胶电泳是科学家们通过首先沿两个不同的轴分离蛋白质条带来分离和分析蛋白质混合物的方法,它是处理复杂或粘稠的蛋白质混合物时最常用的技术,通常蛋白质的大小是重叠的。二维凝胶电泳不同于一维凝胶电泳,因为前者是根据两种不同的蛋白质特性来分离蛋白质,而一维凝胶电泳通常是根据一种特性来分离蛋白质的,例如蛋白质大小。护士凝胶电泳通常用于研究中,利用许多生物分子(如DNA)具有电荷这一事实来分离分子。这一事实对科学家来说是有利的,因为带电分子可以通过多孔基片按大小分开琼脂糖:在多孔的离子凝胶上施加电压梯度。随着时间的推移,分子会穿过凝胶,向与分子的自然电荷相反的电荷方向移动。小分子和重电荷分子的移动速度都比带弱电荷的大分子或蛋白质快。在二维凝胶电泳中通过一个单一的特征分离蛋白质,形成一个梯度,二维凝胶电泳通常利用蛋白质的分子电荷作为一个特征,利用蛋白质的分子电荷将蛋白质聚集成单组分蛋白质,蛋白质质量是分离蛋白质的另一个常见特征蛋白质的二维凝胶电泳在一维凝胶电泳中,蛋白质通过一条单行道在凝胶上运行后,凝胶可以在离心机中旋转,将较重的蛋白质拉下来比较小的蛋白质更快,质量较小的蛋白质。由于通过电压梯度吸引电荷,拉力的方向与蛋白质通过凝胶的方向垂直。电泳在分子研究中有许多用途,包括基于合成特性的蛋白质分离,与蛋白质标记一样,当蛋白质与其他分子标记时,也使用基于特征质量的蛋白质分离。这种技术可用于这些蛋白质复合物,因为标记的蛋白质比未标记的蛋白质更容易通过凝胶下落。虽然实验室中的许多分离凝胶是由琼脂糖制成的,用二维凝胶电泳分离蛋白质最好用聚丙烯酰胺凝胶,这类凝胶用于蛋白质印迹和其他基于蛋白质大小的分析,琼脂糖更常用于DNA片段的分离。
  • 发表于 2020-09-18 05:15
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  • 分类:科学教育

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