RNA扩增是一个过程,它将核糖核酸(RNA)的一部分复制几份,然后产生数千份组成相同的拷贝。RNA片段是大分子,由一连串的核苷酸组成,因此扩增是一个包括从RNA的一部分。RNA扩增在病毒研究中很有用,病毒的遗传物质可以存储为记忆R...
RNA扩增是一个过程,它将核糖核酸(RNA)的一部分复制几份,然后产生数千份组成相同的拷贝。RNA片段是大分子,由一连串的核苷酸组成,因此扩增是一个包括从RNA的一部分。RNA扩增在病毒研究中很有用,病毒的遗传物质可以存储为记忆RNA(mRNA)而不是DNA;研究生物体内的基因表达;以及从转录RNA(tRNA)中产生蛋白质。为了扩增RNA,创建并放大一个互补序列,然后用作模板为了产生RNA拷贝。RNA扩增需要DNA中介,因为RNA通常只以单链、不成对的形式出现,因此必须创建DNA模板,使RNA转录酶发挥作用;RNA不能从自身转录。

病毒,其遗传物质可以存储为记忆RNA(mRNA)而不是DNA。在RNA扩增开始之前,必须首先从污染物质中分离出感兴趣的RNA序列。完成后,将酶逆转录酶添加到RNA模板中。逆转录酶用于创建与原始mRNA互补的碱基对的细胞DNA(cDNA)序列。第一条cDNA链可用于创建第二条可用于聚合酶链反应的cDNA链,一种通过重复的DNA复制循环和随后的两条链分离来放大DNA链的过程。cDNA通常在DNA序列的一端包含引物或酶,作为核苷酸结合的信号,从而产生与原始序列相同的mRNA链

RNA片段是大分子。有几种RNA扩增方法,但产生最大量忠实于原始拷贝的mRNA的方法称为模板转换法。这种方法使用Moloney小鼠白血病病毒的逆转录酶,它在从RNA模板中产生该链后,在第一链cDNA的末端添加一个引物区域。该引物区域也被添加到第二条cDNA链上,由此产生扩增的RNA拷贝。另一种酶,称为启动子,可与第二条cDNA上的引物区域结合,这大大增加了通过转录从这个cDNA链产生的RNA拷贝的数量。