什么是流式细胞术(Flow Cytometry)？

流式细胞术是研究单个细胞通过液体流的过程。细胞内部或表面的成分，首先必须用一种或多种荧光染料进行标记。流式细胞仪仪器内的激光激发这些荧光分子，使它们发出不同波长的光。荧光量可以指示样本中不同类型细胞的百分...

流式细胞术是研究单个细胞通过液体流的过程。细胞内部或表面的成分，首先必须用一种或多种荧光染料进行标记。流式细胞仪仪器内的激光激发这些荧光分子，使它们发出不同波长的光。荧光量可以指示样本中不同类型细胞的百分比。流式细胞术用于用于多种应用的实验室，包括癌症研究、免疫学和细胞周期分析。科学家用烧杯进行流式细胞术分析时，必须用荧光染料对单个细胞悬浮液进行染色，这可以通过一步或两步的过程来完成。细胞蛋白质通常是用针对感兴趣的蛋白质的抗体来染色的。一步过程包括用荧光染料标记的抗体来染色细胞。如果没有标记抗体，细胞可以先用未标记的一级抗体染色，然后用荧光标记的二级抗体染色。一旦细胞被标记，就可以进行流式细胞术分析了。一根装有细胞悬浮液的试管装在流式细胞仪上。细胞通过仪器，在激光前以单一方式通过当激光照射到每个细胞时，光被向前或侧向散射。前向散射测量显示了细胞的大小，而侧面散射是细胞粒度的测量。激光的能量也会激发荧光铬分子，用来染色细胞的荧光染料。流式细胞术中常用的激光是氩离子激光器，它的波长为488纳米（nm）这种光激发绿色染料荧光素的分子，然后发射波长为525纳米的光。流式细胞仪中的光电倍增管（PMT）有滤光片，可以检测各种荧光色素发出的光。该仪器可以有几个PMT，检测不同波长的光。红色二极管，紫外二极管或氦氖（氦氖）是其他可用于流式细胞仪的激光器。用于流式细胞术分析的其他荧光染料包括藻红蛋白、德州红、和，或别藻蓝蛋白。激光和荧光染料的不同组合允许研究人员在同一个实验中收集许多不同细胞标记物的信息。设计用于流式细胞仪的软件可帮助研究人员可视化数据。使用点图、密度图和，或者直方图。可以在感兴趣的细胞周围画出区域，荧光强度可以指示样本中各种细胞的百分比。

发表于 2020-09-18 05:26
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分类：科学教育

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