什么是北方污点(Northern Blot)？

Northern印迹杂交是一种用于检测样本中信使RNA（mRNA）水平的技术，并对存在的mRNA数量进行量化，northern blot由于其简单易用而成为标准。northern印迹技术还允许在单个实验中直接比较多个样本。科学家用烧杯信使RNA是一种...

Northern印迹杂交是一种用于检测样本中信使RNA（mRNA）水平的技术，并对存在的mRNA数量进行量化，northern blot由于其简单易用而成为标准。northern印迹技术还允许在单个实验中直接比较多个样本。科学家用烧杯信使RNA是一种在基因表达时产生的核酸，是一种被转换的基因在细胞内的功能被转录成mRNA。然后，mRNA被运输到细胞的细胞质中，在那里它被翻译成蛋白质。因此，对细胞mRNA样本的Northern印迹分析可以提供有关细胞正在产生的蛋白质阵列的有用信息。在Northern杂交中，从细胞中提取mRNA并通过变性琼脂糖凝胶电泳，使样本中的mRNA根据大小进行分离。同时运行已知大小的mRNA分子样本，以提供对照。一旦电泳完成，样品转移并固定在固体膜上，通常由尼龙等材料制成。在分析之前，样品会暴露在带有放射性标记的探针上几个小时。在分析过程中，用x射线可以清楚地检测到与放射性标记探针杂交的mRNA。northern印迹技术可以观察不同组织类型之间的基因表达模式。从不同组织和器官类型的细胞中提取的信使RNA可以比较，细胞对压力的反应，感染，和许多其他刺激可以检查通过观察不同条件下mRNA表达的差异，科学家可以确定细胞对某些刺激产生何种类型的蛋白质。这可以为未知蛋白质的功能提供线索，或者在已知蛋白质的情况下，提供有关细胞对刺激反应的信息。例如，northern印迹法可能表明，一种未知蛋白质的表达随着特定毒素的存在而增加。然后可以推测该蛋白质参与了降低毒性的作用，可能是通过将化学物质从细胞中运输出去或将其转化为代谢物。如果已知的蛋白质正在检查中，则记录蛋白质表达的变化可以提供反应本身的信息，例如，如果已知分子转运体的表达增加，就可以证实细胞对毒素的反应是将毒素运输出细胞。

发表于 2020-09-18 05:21
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分类：科学教育

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