什么是聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide Gel)？

聚丙烯酰胺凝胶是一种常用于电泳的溶液，通过凝胶和电流将不同大小的分子或颗粒分离出来。聚丙烯酰胺凝胶有不同的配方，但通常含有丙烯酰胺、水、缓冲液、过硫酸铵（APS），以及四甲基乙二胺（TEMED）。这种凝胶作为一种基质，根据其...

聚丙烯酰胺凝胶是一种常用于电泳的溶液，通过凝胶和电流将不同大小的分子或颗粒分离出来。聚丙烯酰胺凝胶有不同的配方，但通常含有丙烯酰胺、水、缓冲液、过硫酸铵（APS），以及四甲基乙二胺（TEMED）。这种凝胶作为一种基质，根据其电荷和大小分离出化合物；凝胶溶液中丙烯酰胺越多，小分子的分离就越好。通常这种凝胶用于蛋白质和DNA分离聚丙烯酰胺凝胶用于蛋白质和DNA的分离。在电泳中，电场使带电粒子穿过凝胶，它的作用就像筛子一样，使不同大小的颗粒分离。凝胶可以吸收电流产生的任何热量。聚丙烯酰胺凝胶通常用于这些步骤，但也可以使用另一种可以产生类似凝胶的化学物质琼脂糖不同长度的聚丙烯酰胺可以被分离，丙烯酰胺的含量在6%到15%之间，当混合凝胶时，丙烯酰胺是未聚合的，这意味着它仍然是单分子加入其他促进结合的化学物质，如TEMED，使分子连接在一起形成长链，即聚丙烯酰胺的“聚”部分硬度可以根据丙烯酰胺和TEMED的初始加入量来控制。丙烯酰胺浓度的一个主要因素是被分析分子的大小。被分离的化合物越小，需要的丙烯酰胺越多；使用最高浓度（15%）分离非常小的颗粒丙烯酰胺的工作原理是控制凝胶中的摩擦力；凝胶的硬度决定了摩擦力的大小。较大的化合物在凝胶中的移动速度会更慢，因为它们的尺寸自然会有更多的摩擦力或阻力。较小的化合物移动速度更快，因为摩擦力较小。为了防止小的化合物从凝胶中移动，添加更多的丙烯酰胺来制造更多的摩擦。DNA聚丙烯酰胺凝胶用于分离不同长度的DNA链。DNA片段只需一个核苷酸就可以分离，组成每一条链的化合物。为了知道哪些片段代表特定的大小，一个包含已知大小片段的标准通常与样本一起运行。然后将DNA片段与标准品进行比较，确定链的大小一个类似的程序被用来确定蛋白质的大小，通常是血液中的蛋白质血液中含有两种主要的蛋白质：球蛋白（一种大尺寸的蛋白质）和血清白蛋白（一种非常小的带负电的蛋白质），用聚丙烯酰胺凝胶分离来确定每种类型的数量

发表于 2020-08-23 05:09
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分类：科学教育

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