什么是电泳迁移率测定(Electrophoretic Mobility Shift Assay)?

分析是一种将细胞的原始片段分离成易于识别的部分的测试。电泳迁移率变化分析是一种利用电将大分子(如蛋白质)通过凝胶基质移动,从而根据大小在不同的大分子之间产生分离的实验。就像汽车电池,负极而正端在电泳迁移率转移...
分析是一种将细胞的原始片段分离成易于识别的部分的测试。电泳迁移率变化分析是一种利用电将大分子(如蛋白质)通过凝胶基质移动,从而根据大小在不同的大分子之间产生分离的实验。就像汽车电池,负极而正端在电泳迁移率转移分析或凝胶转移分析的对侧,这使得电以电荷的形式吸引大分子,每个大分子以不同的速度移动,由于小分子受到凝胶的干扰较少。简单的基因测试和蛋白质分析通常采用电泳迁移率转移分析法。建立电泳迁移率转移分析需要几个步骤。必须首先制备需要分离的大分子。大多数大分子是从活细胞中获得的,需要特定的程序。要获得要分离的部分通常需要离心机和分解细胞的化学反应。离心机会以高速旋转小瓶,并形成所需大分子的颗粒。这是溶解的,通常一种颜色或其他标签是用于帮助跟踪凝胶位移分析。在电泳迁移率变化分析过程中,通常使用离心机来分离细胞的各个部分,也必须是新鲜的粉末状琼脂糖和水的精确混合物,快速从液体变成凝胶。通常,电泳迁移率变化分析将有几个通道用于单独的分析,它用来比较不同的高分子混合物,一个通道总是被设定为一个控制,通常只有一种大分子电源的选择要慎重,在一切准备好之前不要连接电源。电源开启的时间长短决定了大分子的迁移率的变化。重要的是要将碎片分开,以便进行正确的分析。如果电源的时间不合适,未来的比较也将是不准确的。大分子的方向将取决于它们所具有的自然电荷-大多数都会向负端移动。简单的基因测试和蛋白质分析通常是用电泳迁移率偏移分析来完成的。这表现在不同大分子的不同位移上与只有一个大分子的对照道相比,如果发生相互作用,大分子在基质中结合并运行较慢。凝胶转移分析用于快速消除或确认复杂方法可能需要更长时间才能完成的遗传结果。它们还可以确定抗体,一种免疫系统大分子,粘附在可用于对抗细菌和病毒的蛋白质上。电泳迁移率变化分析使用电流使大分子通过凝胶基质移动。
  • 发表于 2020-09-07 05:59
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  • 分类:科学教育

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