专家解读病毒检测的原理是什么？

近日新闻“首个新冠病毒检测试剂盒经由过程查验”。那么病毒检测的道理是什么？来自湖海说神聊仙桃的宾西法尼亚大学病理查验系副传授王萍快速撰文讲解。因为本文相对比力专业，读者伴侣若是有任何问题，请在《返朴》留言提问，我们尽快组织答疑。

1、此刻有哪些检测新型冠状病毒的方式？

检测流行症的策略凡是有两种：检测病原体自己，或检测人体为了抵当病原体而发生的抗体。检测病原体既可以检测抗原（一般是病原体概况卵白，有些用内部核卵白），也可以检测核酸。若是病人的体液中检测到抗体、抗原或核酸三者中的任何一种，则意味着已被传染。因为抗体发生需要时候，一般几天至几周不等，有些免疫功能较弱的病人可能抗体量很低，轻易造当作假阴性（已经传染，可是测试成果看起来没有被传染）。而在传染之初，病原体抗原含量也较低，同样不轻易检测到。所以，今朝普遍采用的是检测病原体的核酸序列，经由过程扩增反映来放大旌旗灯号，检测的活络度高、特异性好。

早在1月11日，新型冠状病毒的全基因序列就已发布（由上海市公共卫生临床中间和公共卫生学院、华中科技大学武汉中间病院、武汉市疾控中间、中国疾控中间流行症预防节制所结合澳大利亚悉尼大学结合完当作），国内和国际多个厂家和机构都敏捷跟进，开辟检测试剂盒。检测试剂盒可以一次性检测几百个样本，而在开辟出检测试剂盒之前，一般只能经由过程RNA测序方式检测病毒，速度会很慢。

新型冠状病毒和SARS病毒的高度同源性对试剂盒设计也有帮忙。因为新型冠状病毒是RNA病毒，试剂盒检测根基都采用反转录加及时聚合酶链式反映法（RT-PCR），扩增病原体的核酸 (RNA) ，同时经由过程荧光探针及时检测扩增产品。这种方式很活络，也可以或许很好地定量。宿世界卫生组织（WHO）网站上列有德国、喷鼻港、泰国、日本和中国疾控中间所利用的检测方式和引物序列，根基都是针对病毒序列中高度保守的2至3个序列——好比编码replicase（复制酶）或者necleocapsid（核卵白衣，核鞘）的核酸序列——来进行检测。可是各个方式用的序列都不完全不异。一些方式利用multiplex，也就是把多个方针序列在统一反映管中扩增；另一些采用分步，先用一个方针序列筛查，阳性后再用另一个序列确认。检测反映的精确水平取决于发布的基因序列的精确水平，以及引物、探针等的设计。从今朝发布的有限数据来看，这些试剂盒的精确率都不错。因为此刻能检测的病人都是临床高度疑似，所以阳性展望值很是高。

也恰是因为这个新型冠状病毒和SARS的相似性很高，若是传染的是SARS病毒，成果也会是阳性的。

当然，也可用测序方式更精确简直认新型冠状病毒，可是对仪器要求高，速度也慢一些，不适合多量量筛查。

2、为什么要multiplex多重反映？为什么要用多个方针序列？

作为筛查手段，要求是快速和高活络度。每个RT-PCR反映需要2小时摆布出成果，multiplex也就是多个检测平行同步进行，可以有用缩短整个流程时候，加速检测速度。别的病毒变异很快，用多个保守方针序列可以防止病毒变异发生假阴性。

3、采样今后，多久能拿到成果？

若是就近在统一个病院可以顿时检测的话，2-3小时就应该可以看到成果，可是本地若是传染节制或仪器人员前提不敷（见下个问题），就需要把样本送到区域甚至全国检测中间（好比疾控中间），加上运输时候，可能需要上24小时甚至几天。

4、利用检测试剂盒有什么要求？为什么不是每个病院都做？

对新型冠状病毒这样的疾病来说，检测所用的血液或其他体液可能具有高传染性，检测和离心过程中发生的气溶胶可能传染检测人员，所以对检测尝试室在传染节制方面有很高要求。SARS病毒要求三级生物平安程度（BSL level 3），埃博拉病毒（Ebola）要求四级生物平安程度（ BSL level 4），必需考虑通风、气压、样本流标的目的（指样本从病房经由过程什么路子到查验尝试室，从哪个门进入，达到尝试台后从哪个仪器到哪个仪器，烧毁样本怎么处置，从哪个门出尝试室等系列流程）等方面（见图2），检测人员也要颠末特别练习。从仪器上来说，至少要有离心计心情、核酸提取仪器、及时聚合酶链式反映仪器等。所以不是每家病院都有前提做检测。

图：微生物危险度品级相对应的典型庇护装备。（来历：CDC）

来历：wikipedia

5、试剂盒欠缺，来不及检测怎么办？

试剂盒欠缺影响确诊人数的统计，但对临床治疗影响不大，因为迄今还没有针对新型冠状病毒的特效药，临床上按照病人表示，CT（计较机断层当作像）看到肺部典型病变，就可以隔离并起头治疗，治疗也以供给病人生命撑持为本家儿，没有需要期待检测成果确诊。如前所述，在疾病高度疑似人群顶用一个机能不错的检测试剂去测，因为患病率（disease prevalence）高，测出的阳性成果有很大可能是真阳性（positive predictive value阳性展望值高），而反之测出的若是是阴性成果，是真阴性的可能性不大（negative predictive value阴性展望值低），所以试剂盒检测成果根基是起确认临床诊断的感化。

撰文 | 王萍

作者简介

王萍，湖海说神聊仙桃人，现于宾西法尼亚大学病理查验系任教，任宾西法尼亚大学病院临床化学及中间尝试室本家儿任，致力于临床疾病检测，研发和财产转化最新的疾病诊断预后方式。

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